PCR儀反應的三個主要步驟簡析
點擊次數(shù):1983 更新時間:2020-12-16
PCR儀的PCR技術(shù)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù)。優(yōu)點是特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等。能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA的片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR儀幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學領域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
PCR儀的PCR反應包括三個主要步驟:
1.Denaturation
是將DNA加熱(至90-95℃)變性,將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復制的模板.
2.Annealing of primers
是令Primers于一定的溫度下(冷卻至55-60℃)附著于模板DNA兩端。
3.Extension of primers
在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase的作用下(加熱至70-75℃)進行引物的延長Extension of primers及另一股的合成。
PCR早設想核酸研究已有100多年的歷史,本世紀60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)。經(jīng)過DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復該過程便可克隆tRNA基因。
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